实验课纲要

一、    实验一　植物总DNA的提取和分光光度法检测

1.       目的　学习从植物组织中提取总DNA的方法。

2.       方法　CTAB法。

3.       要求　OD₂₆₀ / OD₂₈₀ = 1.7 ~ 2.2。

二、    实验二　限制性酶切反应和琼脂糖凝胶电泳

1.       目的　学习掌握限制性酶反应和琼脂糖凝胶电泳的基本原理的实验技术。

2.       方法　用HindIII酶彻底消化λDNA，以λ HindIII为DNA分子量标准，在1%琼脂糖凝胶上电泳。

3.       要求　电泳图谱清晰，至少可见6个带。

三、    实验三　大肠杆菌的培养与遗传转化

1.       目的　学习掌握大肠杆菌培养、感受态细胞制备和遗传转化的基本原理与方法。

2.       方法　LB培养基固体培养转液体培养，0℃条件下CaCl₂低渗溶液制备感受态细胞，电击和热击转化，青霉素抗性培养基检测转化率。

3.       要求　有阳性克隆长出。

四、    实验四（综合性实验）　不同玉米自交系间SSR遗传多样性检测

1.       目的　学习掌握聚合酶链式反应、聚丙烯酰胺凝胶电泳和基因组SSR多态性检测的基本原理和方法。

2.       方法　选用多态性好的SSR引物，对玉米基因组DNA进行PCR扩增，29:1的6%聚丙烯酰胺凝胶电泳检测扩增产物。

3.       要求　特异条带清晰。

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